3.1　均一多糖检测与分子量测定技术

多糖属于大分子物质，它的纯度不能用一般小分子化合物纯度的标准来测量和表示。多糖纯度所代表的是某一多糖类似链长的平均分布。经常使用的纯度检测方法有渗透压法、超速离心法、高效凝胶渗透色谱法、高压电泳法等。

3.1.1　渗透压法

利用膜渗透压法可以测定范围在10～500kDa的多糖的分子量，并且不需要多糖标准品。张俐娜等采用改良型Bruss膜渗透压计及动态法测定生漆多糖的分子量，并优化了实验条件^［5］。

3.1.2　超速离心法

超速离心法可以直接测定多糖的分子量，具有样品用量小、时间短、不需要标准品等优点。黄祥瑞等采用超速离心法对茯苓多糖和木瓜多糖的分子量进行了测定，茯苓多糖分子量为1.08×10⁵Da，木瓜多糖分子量为1.21×10³Da，并与黏度法测量结果比较，结果一致^［6］。

3.1.3　高效凝胶渗透色谱法

高效凝胶渗透色谱法（high performance gel permeation chromatography，HPGPC）具有快速、准确、分辨率高、重现性好、样品量小等优点。常用的检测器有示差折光检测器（refractive index detector，RID）和蒸发光散射检测器（evaporative light scattering detector，ELSD）。

杨翠娴等采用HPGPC法测定龙眼均一多糖的分子量，使用示差折光检测器，TSK G4000PWxl色谱柱，流速为0.5mL·min^-1，测得中性多糖LPS-N的分子量为13.8kDa，酸性多糖LPS-A1和LPS-A2的分子量分别为1328kDa和571kDa^［7］。徐从立等采用HPGPC-ELSD法测定商陆多糖的相对分子质量，使用TSK G2000SW色谱柱，流速为1.0mL·min^-1，漂移管温度40℃，气体（N₂）压力2.0×10⁵Pa，测定多糖的相对分子质量为76896Da^［8］。赖付绕等用HPGPC-RID测定水溶性毛豆均一多糖（MP1和MP2）的分子量，使用TSK G-5000 PW xL凝胶柱和Waters 2414 RID，流速为0.6mL·min^-1，洗脱剂为0.02mol·L^-1的KH₂PO₄溶液，毛豆均一多糖MP1和MP2的分子量分别为83000和45000Da^［1］。匡海学等选用HPGPC测定麻黄均一多糖（ESP-1）分子量，使用ELSD 2000检测器，Shodex sugar KS-805色谱柱，等度洗脱流速为0.5mL·min^-1，经测定为单一对称峰，分子量为1.4×10⁵Da^［9］。目前高效凝胶渗透色谱法是测定中药多糖分子量应用最普遍的方法^［10］。