第3章　多糖的结构研究技术

多糖的结构研究是多糖类新药研发的关键问题和瓶颈问题，多糖的分子结构不明确、多糖的药效物质基础不清楚就无法进行质量控制研究。作为一类复杂的生物大分子化合物，多糖的结构与蛋白质类似，可分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构^［1～3］。

多糖的一级结构研究包括分子量大小及分布、单糖的组成及摩尔比、单糖的排列顺序、糖苷键的连接方式、异头碳构型以及糖链有无分支、分支的位置与长短、重复结构单元等。糖的一级结构非常复杂，再加上糖残基上可以连接硫酸基团、乙酯基团、磷酸基团、甲基化基团，这就更加剧了糖一级结构的复杂性。多糖的二级结构是指多糖骨架链间以氢键结合的各种聚合体。通常糖苷键有两个可旋转的主链二面角：φ（H₁-C₁-O₁-C糖配基）、ψ（C₁-O₁-C糖配基-H糖配基）。两个单糖若为1，6连接，则还有第三个可旋转的二面角ω（O₆-C₆-C₅-O₅），解决寡糖二级结构关键在于确定φ、ψ、ω的取值。三级结构是指多糖链一级结构的重复顺序，由于糖单位的羟基、羧基、氨基以及硫酸基之间非共价相互作用，导致有序的二级结构空间有规则而粗大的构象，即是多糖链的三级结构。多糖的四级结构是指多聚链间非共价键结合形成的聚集体^［4］。

多糖的结构测定是比较困难的，但解剖多糖的低级结构和空间结构，对于明确多糖的生物学功能具有十分重要的意义。目前阐明多糖的一级结构已建立了许多分析方法，随着现代分析技术的出现与发展，新技术不断引入到糖链的结构分析中。下面对多糖一级结构的测定方法进行阐述。