第2章 病原体研究

2.1 病毒

超显微水平研究提示，病毒感染与川崎病发病相关。应用光镜和电镜检测急性川崎病患者的支气管纤毛上皮细胞，经免疫组化检测到球状体细胞核酸和蛋白质，电镜检测到包涵体；而对照组和非川崎病组患者均未检测到支气管纤毛上皮细胞[1]。用急性川崎病动脉组织IgA浆细胞合成抗体证实，支气管纤毛上皮细胞存在胞质包涵体，包涵体周围未见细胞角蛋白cage，肺组织可见干扰素（IFN）相关通路变化，未检测到已知病毒核酸序列，且电镜可检测到病毒样微粒聚集。此研究表明，川崎病包涵体可能是由病毒诱导，并推测有一种新型RNA病毒参与川崎病发病[2]。在7例川崎病死亡病例中，86%（6/7）经肺组织电镜检测细胞包涵体（ICI），比对照组[26%（7/27）]显著升高，核酸染色提示ICI内为RNA；泛RNA病毒构成包涵体，导致支气管上皮和巨噬细胞持续感染[3]。

我国台湾地区报道，在2004-2010年间有226例川崎病患儿，并选取年龄性别匹配的健康儿童作为对照组，发现川崎病组病毒分离阳性率比对照组高（7.5%vs.2.2%），同时病毒PCR检测阳性率高（50.4%vs.16.4%），包括肠道病毒（16.8%vs.4.4%）、腺病毒（8.0%vs.1.8%）、人鼻病毒（26.5% vs.9.7%）和人冠状病毒（HCoV）（7.1%vs.0.9%）的阳性率均高于对照组，这些结果提示常见呼吸道病毒与川崎病发病相关[4]。Jaggi等[5]比较发现，对于符合美国心脏协会（AHA）标准的川崎病患儿人腺病毒（HAdV）检出率为8.8%（5/57），而不符合AHA标准的不完全性川崎病患儿人腺病毒的检出率为25%（5/20），并且HAdV感染组滴度较川崎病合并感染组高，以此可用于区分腺病毒感染与川崎病合并腺病毒感染。但Shike等[6]应用PCR和抗体检测却未发现腺病毒及相关病毒与川崎病的发病有相关性。Shimizu等[7]报道了急性川崎病患者鼻咽拭子人冠状病毒（HCoV）亚型NL63/NH检测情况，其RT-PCR检出阳性率为2.1%（1/48）; PCR检测呼吸道分泌物HCoV-NH，川崎病组阳性率为72.7%（8/11），显著高于对照组[4.5%（1/22）]，提示HCoV-NH可能与川崎病发病相关[8]。但亦有报道用PCR检测鼻咽冲洗标本HCoV-NL63，其中川崎病组2/26阳性，对照组4/52阳性，并无显著性差异[9]。Chang等[10]对53例川崎病病例的血清、外周血单个核细胞（PBMC）、鼻咽吸出物、咽拭子和肛拭子标本进行PCR检测，结果显示HCoV-NH和HCoV-NL63均为阴性。Shirato等[11]应用免疫荧光和病毒中和实验，在未接受IVIG治疗的川崎病患儿中检测HCoV-NL63以及HCoV-229E的两个亚株（ATCC-VR740和Sendai-H），发现在川崎病患儿中未检测出HCoV-NL63抗体，而HCoV-229E抗体阳性率升高，提示川崎病发病与HCoV-229E相关，而与HCoV-NL63关系不大。此外，还有研究用PCR检测鼻咽分泌物、血清和粪便标本中的人博卡病毒（HBoV），结果31.3%（5/16）为阳性，提示HBoV可能参与川崎病发病[12]。Bajolle等[13]报道了32例川崎病病例，其中在3例病例血清和7例病例鼻咽拭子中检测出HBoV-DNA，且均发生在冬春季，恢复期有4例病例检出IFNα，提示HBoV感染可能是川崎病发病的协同因素。值得注意的是，美国食品药品管理局（FDA）报道，1990-2007年共有97例川崎病病例病史中接种过轮状病毒（RV）活疫苗，但都是散在发病，人群发病率低，表明RV活疫苗未见有增加川崎病发病的风险，现仍在持续监测中[14]。MacNeil等[15]分析了美国纽约和加州两地资料，结果表明，RV冬季多见，川崎病全年发病但在冬春季达高峰，因此其余病原体也可能影响川崎病发病分析结果。对29例川崎病患儿在1年内检测EB病毒抗体5次，结果VCA-IgG和IgM阳性率分别为41.4%和0%，有1例于2个月后出现IgM阳性。Lee等[16]比较发现，有川崎病病史的患者的EBNA-IgG阳性率高，与对照组相比，EBV、巨细胞病毒（CMV）、单纯疱疹病毒（HSV）和带状疱疹病毒（HZV）血清抗体阳性率无显著性差异。