- 血站技术手册
- 许建荣 李聚林 江朝富
- 2449字
- 2020-08-28 14:16:03
第一节 血液成分制备概述
随着科学技术的发展和进步,血液成分制备方法将能制备更多的血液成分品种。新型血液分离制备技术和设备的研究应用、高质量血液成分的制备、白细胞滤器的广泛应用及病毒灭活技术的完善等,都将保证临床输血最大限度地获得输血的疗效,最大限度地减少输血不良反应。
一、血液成分制备原理
(一)不同血液成分的比重
全血中红细胞、血小板和血浆的比重各不相同,分别为红细胞1. 090~1. 111、粒细胞1. 080~1. 095、淋巴细胞1. 050~1. 078、血小板1. 030~1. 060、血浆1. 025~1. 030。这是重力离心、分离制备各种血液成分的基础。
(二)离心、分离
通过控制离心机的离心转速、时间、温度等因素,利用离心力将全血的各种成分离心、分离成不同的层面:血浆比重最小在最上层,呈浅黄色;红细胞比重最大在最下层,呈红色;白细胞和血小板介于两者之间,为一灰白色的膜层,称白膜(buffy coat,BC)。利用虹吸或挤压的方法,将它们一一分离到与血袋首袋密闭相连的其他血袋中,得到较纯、较浓缩的单一血液成分。
二、血液成分制备方法
血液成分制备方法可分为两种。
(一)手工法离心制备
以献血者捐献的全血为原料,通过离心的方法分离制备各种血液成分。
(二)血细胞分离机采集(机采)制备
详见本书第三章血液采集,用血细胞分离机直接从单一献血者体内采集制备高度浓缩、高纯度的某种血液成分,而将其他(不需要的)成分回输给献血者,如机采血小板。随着科学的发展和技术的进步,血液成分制备方法越来越多,制备的成分种类也越来越多,而且制备的血液成分的浓度更浓、纯度更高,因此疗效更好,输血不良反应更少。
三、血液成分制备的种类
血液成分包括血细胞成分和血浆成分等。血细胞成分有红细胞、白细胞、血小板类制品;血浆成分有血浆和血浆衍生物制品(冷沉淀、白蛋白、免疫球蛋白以及其他凝血因子等)。随着血液分离设备的发展和制备技术的进步,新的血液成分品种将越来越多。血液成分品种见GB18469—2012《全血及成分血质量要求》。
(一)红细胞类成分
浓缩红细胞、悬浮红细胞(红细胞悬液、添加剂红细胞)、洗涤红细胞、去白细胞红细胞、冰冻红细胞、年轻红细胞及辐照红细胞等。
(二)白细胞类成分
浓缩白细胞(机器单采粒细胞)。
(三)血小板类成分
单采血小板、浓缩血小板(手工血小板)、混合血小板、去白细胞单采血小板、洗涤血小板及辐照血小板等。
(四)血浆类成分
新鲜冰冻血浆(fresh frozen plasma,FFP)、冰冻血浆(普通冰冻血浆)、新鲜液体血浆、液体血浆、病毒灭活血浆、冷沉淀、血浆蛋白组分(plasma protein fraction,PPF)等。
(五)其他血液成分
外周血造血干细胞、基因重组产品(如各种造血生长因子、凝血因子)等。
四、血液成分制备的基本要求
(一)制备环境
1.制备环境应卫生整洁,定期消毒。
2.应尽可能以密闭系统制备血液成分。
3.用于制备血液成分的开放系统,制备室环境应达到10 000级、操作台局部应达到100级(或在超净台中进行)。
4.制备需要冷藏的血液成分时,应尽可能缩短室温下的制备时间。
(二)设备
1.设备数量及功能应能满足制备工作的要求。
2.应建立和实施设备的确认、维护、校准和持续监控等管理制度,实施唯一性标识及使用状态标识,以确保设备符合预期使用要求。
(三)物料
1.物料应能满足制备工作的需要。
2.物料质量及其生产和供应方的资质应符合相关法规的要求。
3.物料使用前,应检查有效期、外观质量等,确认符合质量要求后方可使用。对不合格物料应进行标识、隔离,防止误用。
(四)制备方法确认
制备新的血液成分品种或制备条件发生明显改变时,应对血液制备方法进行确认。
(五)原料血液
1.用于制备血液成分的原料血液应符合GB18469—2012《全血及成分血质量要求》的要求。
2.原料血液的保存和运输应当符合国家有关规定的要求。
3.接收原料血液时,应核对数量,检查外观、血袋标签等内容,确认符合质量要求后方可用于血液成分制备。
五、大容量冷冻离心机的使用
根据不同血液成分的比重差异,用大容量冷冻离心机,利用重力离心法分离不同比重的血液成分。为有效保护各种血液成分的生理功能,除制备血小板、粒细胞的离心温度为(22±2)℃外,其他血液的离心必须在较低温[一般为(4±2)℃]环境进行。因血袋容量一般为200~400ml,因此须使用大容量冷冻离心机。
(一)离心机运行参数
根据所制备血液成分要求和离心机操作手册,确定离心力(用离心转速换算)、加速和减速强度、离心时间和温度等离心参数,编制离心程序。离心机的每分钟转数,离心时间直接影响各种成分的分离效果,必须定期给予校正和确认。常用的血液成分离心参数见表4-1。
表4-1 常用的血液成分离心参数
注:离心力(g)=0. 000 011 18×离心半径(cm)×离心转速(n 2);常用的不同品牌大容量冷冻离心机离心半径不同,分别为24. 8,25. 5,29. 7cm等
(二)血液离心操作步骤
1.离心机预运转
开启离心机,设置离心工作温度(4℃或22℃),转速3600rpm,预运转10~30分钟,使离心机达到工作要求。
2.血液放置
将要离心的血袋,直立放置于离心内杯内,用柔软的塑料片调配平衡,避免血袋折叠;将对应的离心内杯对称位放于大容量冷冻离心机的离心杯内,外露过多的联袋或塑料管道都要放入离心杯内,不要超过离心内杯的高度,防止离心机开启后因塑料管缠绕而损坏;盖上内、外盖并压到底。
3.设置离心参数
根据所需分离制备血液成分的类型选择不同的离心力,设置不同的离心转速、时间及温度(或按照预设程序输入程序编号)。
4.启动离心机离心血液
要注意观察转速、时间及温度变化,观察有无异常现象,确保离心机达到设定的参数运转。
5.离心结束
离心机转速显示为结束后,打开外、内盖,将离心内杯连同血液轻轻从离心机取出,避免振动。
(三)大容量冷冻离心机使用注意事项
1.在使用过程中如遇到异常,请立即按“STOP”键让离心机停止运行,状态屏SPEED处显示END后,即可打开离心腔门,并在科室交接记录上记录所发生的情况及故障信息,最后关闭离心机电源。
2.如果离心机长时间不再使用,必须关闭机器电源并保持离心腔门为敞开状态,擦干冷凝水。
3.必须安排人员定期清洁、检查、保养和维护离心机。
4.定期校准、确认离心机转速、温度等参数,根据血液成分的离心效果,调整离心参数。