18.发酵灭菌两段式制三级种的操作

（1）基质拌料　我们的试验和生产较之常规生产用水稍微少一点，含水率达到55%即为高限。

（2）发酵操作　拌料后即行建堆发酵。自建堆后每24小时翻堆一次：20℃以下时翻堆5～6次，20℃以上时翻堆3～4次。

（3）灭菌操作　正常装袋。加热至灭菌室内达到80℃时装锅，袋内达到95℃以上时，维持3小时停火即可，闷一夜。

（4）其他操作　冷却、接种等操作按常规。

（5）生产效果　较之常规生产，大大降低了污染率，成功率一般可达到100%。明显表现就是：完成灭菌或已完成接种的菌袋，偶有机械划破塑袋时，破口处也不污染。试验中，我们曾多次、多点扎破塑袋、划开2厘米左右的破口进行抗性试验，并将破口处的塑料膜撕开，直到完成发菌，该试验点也不污染。自20世纪90年代至今，我们将做基地服务时的专项技术，后在冀、鲁等地进行推广，应用业户的三级种生产得到了空前的“无污染”，获得了良好的社会应用效果。

要点：每次翻堆，均应根据气温、料温等具体状态予以适当补水，最终基料含水率控制在60%左右，最高不超过65%为宜。