二、DNA含量
23对染色体约为7.18pg。但在定量细胞学上细胞核的DNA含量并不是直接测定出来的,也不是一个绝对的数量。DNA定量细胞学常用c(content)作为单位来衡量DNA含量。1个c为正常G0/G1细胞DNA含量的一半,故G0/G1细胞为2c细胞(2倍体细胞),而G2/M细胞为4c细胞(4倍体细胞)。
DNA-ICM是通过测定染色细胞核的IOD(integrated optical density)来判断细胞核的含量的。由于DNA含量是由二维结构测定的,它不完全反映染色质的倍数(图1-3)。为了避免以上的差别,在测定DNA含量时,用DNA指数(DNA index)来表示DNA含量,即:
图1-3 一个Feulgen染色细胞核在CCD照相机下所显示的图形
阴影的小方格的和为IOD。
如果当被测细胞处于G0/G1期时,其IOD量与正常细胞IOD平均值很接近,故DNA指数为1,即为2c。当细胞处于G2/M期时,其IOD量正好约为正常细胞IOD平均值的2倍,故DNA指数为2,即为4c。处于S期的细胞,DI指数在1~2之间,即2c~4c之间。当细胞为8倍体时,DI值约为4(图1-4)。
图1-4 DNA定量细胞测定直方图
纵轴为细胞数,横轴为DNA含量。2c(DI =1),4c(DI =2),8c(DI=4)。
由此可见,DNA定量细胞学测定的DNA含量是个相对单位,而不是测定DNA含量的绝对值。由于淋巴细胞内DNA含量及形态较为稳定,很多DNA定量细胞学测定淋巴细胞IOD,将淋巴细胞DNA作为正常细胞DNA的参照来比较被测细胞的DNA。